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- 中文名
- 色谱
- 外文名
- chromatography [3]
- 又 称
- 色层法或层析法
- 性 质
- 物理化学分析方法
- 方 式
- 利用不同溶质（样品）
- 学 科
- 分析化学
历史研究
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色谱
在色谱法中，静止不动的一相（固体或液体）称为固定相（
stationary phase
） ；运动的一相（一般是气体或液体）称为流动相（
mobile phase
）。
[1]
分类
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柱色谱
纸色谱
薄层色谱
是在玻璃板上涂以固定相涂层，然后点样，下端浸入溶剂，同样自下而上分离。常用于探索柱色谱实验条件，溶剂和固定相的选择等。
常用的固定相有硅胶、氧化铝、硅藻土、纤维素等，
[4
]
常用流动相为水、苯等各种有机溶剂。
其他分类方法
色谱法按流动相种类的分类：
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色谱类型
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流动相
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主要分析对象
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气相色谱法
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气体
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挥发性有机物
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液相色谱法
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液体
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可以溶于水或有机溶剂的各种物质
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超临界流体色谱法
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超临界流体
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各种有机化合物
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电色谱法
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缓冲溶液、电场
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离子和各种有机化合物
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近几十年色谱作为一种强大的分离技术与MS等检测手段的联用得到了极大的发展，GC－MS，HPLC－MS等在兴奋剂检测，食品安全分析等方面应用广泛，是唯一成熟的分析方法。
[1]
色谱
色谱法的应用
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色谱法的应用可以根据目的分为制备性色谱和分析性色谱两大类。
分析性色谱的目的是定量或者定性测定混合物中各组分的性质和含量。定性的分析性色谱有薄层色谱、
纸色谱
等，定量的分析性色谱有气相色谱、
高效液相色谱
等。色谱法应用于分析领域使得分离和测定的过程合二为一，降低了混合物分析的难度缩短了分析的周期，是比较主流的分析方法。在
中华人民共和国药典
中，共有超过约600种化学合成药和超过约400种中药的质量控制应用了高效液相色谱的方法。
[1]
色谱柱
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三种不同型号的色谱柱
步骤3、将
色谱柱
连接于进样口上色谱柱在进样口中插入深度根据所使用的GC仪器不同而定。正确合适的插入能最大可能地保证试验结果的重现性。通常来说，色谱柱的入口应保持在进样口的中下部，当进样针穿过隔垫完全插入进样口后如果针尖与色谱柱入口相差1-2cm，这就是较为理想的状态。（具体的插入程度和方法参见所使用GC的随机手册）避免用力弯曲挤压毛细管柱，并小心不要让标记牌等有锋利边缘的物品与毛细柱接触摩擦，以防柱身断裂受损。将色谱柱正确插入进样口后，用手把连接螺母拧上，拧紧后（用手拧不动了）用扳手再多拧1/4-1/2圈，保证安装的密封程度。因为不紧密的安装，不仅会引起装置的泄漏，而且有可能对色谱柱造成永久损坏。
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Psi
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15m
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25m
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30m
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50m
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100m
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0.20mm
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10-15
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20-30
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18-30
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40-60
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80-120
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0.25mm
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8-12
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13-22
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15-25
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28-45
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55-90
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0.32mm
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5-10 8-
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15
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10-20
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16-30
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32-60
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0.53mm
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1-2
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2-3
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2-4
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4-8
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6-14
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以上仅为建议的起始设置，具体数值要依据实际的载气流速。将色谱柱的出口端插入装有己烷的样品瓶中，正常情况下，我们可以看见瓶中稳定持续的气泡。如果没有气泡，就要重新检查一下载气装置和
流量控制器
等是否正确设置，并检查一下整个气路有无泄漏。等所有问题解决后，将色谱柱出口从瓶中取出，保证柱端口无溶剂残留，再进行下一步的安装。
步骤5、将色谱柱连接于检测器上其安装和所需注意的事项与色谱柱与进样口连接大致相同。如果在应用中系统所使用的是ECD或NPD等，那么在老化色谱柱时，应该将柱子与
检测器
断开，这样检测器可能会更快达到稳定。
步骤6、确定载气流量，再对色谱柱的安装进行检查注意：如果不通入载气就对色谱柱进行加热，会快速且永久性的损坏色谱柱。
步骤7、色谱柱的老化色谱柱安装和系统检漏工作完成后，就可以对色谱柱进行老化了。
对色谱柱升至一恒定温度，通常为其温度上限。特殊情况下，可加热至高于最高使用温度10-20℃左右，但是一定不能超过色谱柱的温度上限，那样极易损坏色谱柱。当到达老化温度后，记录并观察
基线
。初始阶段基线应持续上升，在到达老化温度后5-10分钟开始下降，并且会持续30-90分钟。当到达一个固定的值后就会稳定下来。如果在2-3小时后基线仍无法稳定或在15-20分钟后仍无明显的下降趋势，那么有可能系统装置有泄漏或者污染。遇到这样的情况，应立即将柱温降到40℃以下，尽快的检查系统并解决相关的问题。如果还是继续的老化，不仅对色谱柱有损坏而且始终得不到正常稳定的基线。
一般来说，涂有极性固定相和较厚涂层的色谱柱老化时间长，而弱极性固定相和较薄涂层的色谱柱所需时间较短。而PLOT色谱柱的老化方法有各不相同。PLOT柱的老化步骤：HLZ Pora系列250℃，8小时以上Molesieve分子筛300℃12小时Alumina氧化铝200℃8小时以上由于水在氧化铝和分子筛PLOT柱中的不可逆吸附，使得这两种色谱柱容易发生保留行为漂移。
步骤8、设置确认载气流速对于
毛细管色谱柱
，载气的种类首选高纯度氮气或氢气。载气的纯度最好大于99.995%，而其中的含氧量越少越好。如果您使用的是毛细管色谱柱，那么依照载气的平均线速度（cm/sec），而不是利用载气流量（ml/min）来对载气做出评价。因为柱效的计算采用的是载气的平均线速度。推荐平均线速度值：氮气：10-12cm/sec 氢气：20-25cm/sec载气杂质过滤器在载气的管线中加入气体过滤装置不仅可以延长色谱
柱寿命
，而且很大程度的降低了背景
噪音
。建议最好安装一个高容量脱氧管和一个载气净化器。使用ECD系统时，最好能在其辅助气路中也安装一个脱氧管。
注意：当空气中氢气的含量在4-10%时，就有爆炸的危险。所以一定要保证实验室有良好的通风系统。
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