用于对
DNA
进行自动测序的链
末端终止法
:在原初的方法中,需要对DNA的引物端进行荧光标记,以便在测序凝胶板上确定DNA色带的位置。在改进的方法中,对作为链终止剂的4种
双脱氧核苷酸
(ddTBP)分别进行荧光标记,电泳结束后不同长度的
DNA分子
彼此分开,经紫外线照射,4种被标记的双脱氧核苷酸发出不同波长的荧光。通过分析荧光的光谱便可以分辨出DNA的序列。DNA探测:
溴化乙啶
是一种
荧光染料
,当它在溶液中自由改变构型时,只能发出很弱的荧光;当它嵌入核酸
双链
的
碱基对
之间与DNA分子结合后,便可以发出很强的荧光。因此在
凝胶电泳
中,一般加入溴化乙啶对DNA染色。
DNA微阵列
(
生物芯片
):需要对
基因组探针
进行荧光标记,最后通过荧光信号确定靶标序列。免疫学中的免疫
荧光检查法
:对
抗体
进行荧光标记,从而可以根据荧光的分布和形态确定
抗原
的部位和性质。
流式细胞仪
(又称荧光激活
细胞分选
器,
FACS
) :对样本细胞进行荧光标记,再用
激光
束激发使之产生特定的荧光,然后用
光学系统
检测并将信号传输到计算机进行分析,从而得到细胞相应的各种特性。
荧光技术
还被应用于探测和分析DNA及
蛋白质
的
分子结构
,尤其是比较复杂的
生物大分子
。水母发光蛋白最早是从
海洋生物
水母
(Aequorea victoria)中分离出来的。当它与Ca
离子共存
时,可以发出绿色的荧光。这一性质已经被应用于实时观察细胞内
Ca离子
的流动。水母发光蛋白的发现推动了人们进一步研究海洋水母并发现了
绿色荧光蛋白
(Green Fluorescent Protein,GFP)。绿色荧光蛋白的
多肽链
中含有特殊的
生色团
结构,无需外加
辅助因子
或进行任何特殊处理,便可以在紫外线的照射下发出稳定的绿色荧光,作为
生物分子
或
基因探针
具有很大的优越性,所以绿色荧光蛋白及相关蛋白已经成为
生物化学
和
细胞生物学
研究的重要工具。萤光显微成像技术:
全内反射荧光显微镜
很多生物分子具有内禀的荧光性,不需要外加其他化学基团就可以发出荧光。有时侯这种内禀的荧光性会随着环境的改变而改变,从而可以利用这种对
环境变化
敏感的荧光性来探测分子的分布和性质。例如
胆红素
与
血清白蛋白
的一个特殊位点结合时,可以发出很强的荧光。又如当血
红细胞
中缺少铁或者含有铅时,会产生出
锌原卟啉
而不是正常的
血红素
(
血红蛋白
);锌原卟啉具有很强的荧光性,可以用来帮助检测病因。
由光照(通常是紫外线或X射线)激发所引起的发光称为
光致发光
,例如荧光和磷光;由化学反应所引起的发光称为
冷光
,演唱会上用的荧光棒是通过两种化学液体混合后发生化学反应发光的;由
阴极射线
(高能电子束流)所引起的发光称为
阴极射线发光
,电视机
显像管
的
荧光屏
发光就是阴极射线发光;生物体的
冷发光
现象是
生物发光
,比如
萤火虫
发出的光,是“萤光”,“萤”字在
古汉语
中与“荧”字通假,部分华文地区,“萤”字与昆虫有关。荧光在台湾多称
萤光
;在中国大陆多称
荧光
,而“萤光”则通常是指萤火虫发出的光。