【摘要】： 在肿瘤微环境中,TIGIT是表达在NK细胞,T细胞表面的一种抑制性受体,当与配体CD155,CD112结合后会引起NK细胞,T细胞耗竭,从而促进肿瘤的生长。通过研究靶向的TIGIT的单域抗体,阻断TIGIT/CD155这一信号通路会增强细胞毒性T淋巴细胞及NK细胞的抗肿瘤应答,延缓肿瘤生长,与传统的单克隆抗体相比而言,单域抗体具有分子量小,能透过血脑屏障,易于改造和重组表达等优点。将为肿瘤的诊断与治疗以及药物研发奠定坚实的基础,未来具有潜在应用前景。本试验首先克隆出TIGIT基因,并构建TIGIT表达载体,以大肠杆菌为表达系统,表达并纯化TIGIT蛋白;以TIGIT蛋白作为抗原免疫成年健康双峰驼,构建TIGIT特异性噬菌体抗体库,使用商品化、真核表达的TIGIT蛋白对构建好的抗体库进行3轮的富集、筛选,经Phage ELISA鉴定TIGIT蛋白结合特异性阳性克隆,将阳性克隆基因连接至原核表达载体pET-25b-SBP,采用低温诱导进行可溶性表达,得到可溶性的抗TIGIT特异性单域抗体,经ELISA鉴定其亲和活性。本课试验应用噬菌体展示技术成功获得了抗TIGIT的单域抗体,并在后续试验中对单域抗体亲和力及生物活性进行了初步研究,为单域抗体开发及肿瘤免疫治疗药物奠定基础。 尹晓婉;刘婷婷;张子宁;丁海波;付帅;赵雯;唐甜;王晓楠;姜拥军;; HIV感染者CD4~+T细胞TIGIT受体及其配体CD155表达情况研究 [J];免疫学杂志;2017年11期 陈茜;高义;黄敏;阿孜古丽·艾海提;陈忠华;刘喆隆;余学锋;何文涛;; 小鼠分泌型TIGIT慢病毒载体的构建及其功能研究 [J];现代免疫学;2014年01期 常宗宏;郑晓凤;王俊科;张久聪;; 抑制性受体TIGIT在慢性病毒感染中的作用机制研究进展 [J];生物技术通讯;2019年04期 刘婷婷;尹晓婉;张子宁;丁海波;付帅;赵雯;唐甜;王晓楠;姜拥军;; 免疫调控受体PD-1和TIGIT在HIV感染者/HIV患者CD3~+CD4~-T细胞表达研究 [J];现代免疫学;2018年03期 陆小凡;夏欢;计云霞;吴昊;粟斌;张彤;; HIV-1慢性感染者CD8~+Tscm异常免疫活化对T细胞耗竭的影响 [J];北京医学;2018年04期 高峰;洪亚珍;陈晨;李智;丛晓凤;刘子玲;; 癌症治疗的新兴免疫靶点及相关研究进展 [J];中国肿瘤临床;2020年19期 欧仕颖;余长芳;余海霞;泽汪格玛;杨建蓉;; HIV感染者外周血PD-1、TIGIT基因表达水平与T细胞分化、凋亡分子分泌的相关性 [J];疑难病杂志;2019年08期 王晶哲;王小铃;王娟;杨鑫鑫;闫美娜;李欣悦;王荟;刘霞;邵启祥;; mTIGIT-mLumin跨膜融合蛋白慢病毒载体和真核表达载体的构建及体外的稳定表达 [J];江苏大学学报(医学版);2018年03期 罗清;; 系统性红斑狼疮外周血T细胞亚群表面TIGIT的表达 [A];江西省中西医结合学会检验医学专业委员会成立大会暨第一次中西医结合检验医学学术交流会资料汇编[C];2015年 张清;毕嘉成;魏海明;孙汭;田志刚;; TIGIT阻断性单克隆抗体的抗肿瘤免疫治疗与效应机制探究 [A];第十四届全国肿瘤生物治疗大会论文集[C];2015年 张清;毕嘉成;孙汭;田志刚;; TIGIT阻断对肿瘤发展和NK细胞耗竭的影响及机制探究 [A];第十一届全国免疫学学术大会分会场交流报告集[C];2016年 刘湘奇;李群星;周颖;王智;; 负性免疫检查点分子TIGIT在口腔鳞癌中的表达及其对T细胞功能的体外研究 [A];2019第九次全国口腔生物医学学术年会论文汇编[C];2019年 高义;陈忠华;; 过表达TIGIT的MIN-6细胞移植延长STZ诱导的糖尿病小鼠的存活时间 [A];2012中国器官移植大会论文汇编[C];2012年 杨梦如;刘岩;莫碧瑶;薛有求;叶聪秀;刘梦;吴云婷;郑颂国;潘云峰;; Helios、CD226和TIGIT在类风湿关节炎患者外周血Treg的表达及与疾病活动度的相关性研究 [A];第十二届全国免疫学学术大会壁报交流集[C];2017年 韩冬;徐银凤;赵信平;杜鹏;杨志新;; 靶向TIGIT与CSF1R的免疫治疗抗体 [A];中国生物工程学会第十三届学术年会暨2019年全国生物技术大会论文集[C];2019年